ChromaLink Biotin Maleimide將紫外線可追蹤的生物素結(jié)合到含硫醇的蛋白質(zhì)、肽和/或抗體上。ChromaLink Biotin Maleimide已經(jīng)被設(shè)計(jì)成包括許多新的特征的標(biāo)記試劑。如圖1所示，分子結(jié)構(gòu)包含一個(gè)雙芳基腙發(fā)色團(tuán)(a)，由PEG3連接臂(b)連接到生物素(c)。這種試劑允許結(jié)合生物素的直接光譜定量。延伸的PEG3接頭保持生物素/鏈霉親和素的親和力，并在修飾后保持蛋白質(zhì)的溶解性，而馬來(lái)酰亞胺官能團(tuán)(d)有效地修飾水性緩沖液中的硫醇。

圖1. ChromaLink Biotin Maleimide的結(jié)構(gòu)

用ChromaLink^??Biotin標(biāo)記蛋白質(zhì)消除了通常用于定量生物素?fù)饺氲姆爆嵸M(fèi)時(shí)的HABA測(cè)定的需要。相反，生物素的摻入通過簡(jiǎn)單的分光光度測(cè)量在兩個(gè)波長(zhǎng)下定量(A280 / A354)。典型的標(biāo)記結(jié)果在圖2中通過四個(gè)樣品的光譜重疊掃描來(lái)說(shuō)明。如圖所示，牛IgG (100微升@?1mg/ml)用ChromaLink^??Biotin標(biāo)記為0、5、10和15mol。光譜分析說(shuō)明了生物素?fù)饺氲目梢暬投渴嵌嗝慈菀住?/p>

圖2.?用ChromaLink^??Biotin標(biāo)記的牛IgG重疊光譜。使用了各種生物素-蛋白質(zhì)摩爾質(zhì)量(5X，10X和15X)。注意354nm處的紫外信號(hào)表明生物素的摻入。所有光譜都在分子動(dòng)力學(xué)光譜儀上掃描(220-420nm)。

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