在藥物研發(fā)領(lǐng)域中靶向Toll樣受體以及其它模式識別受體的研究越來越吸引人們的注意力。作為一個在天然免疫研究領(lǐng)域中的公認(rèn)的業(yè)界典范，InvivoGen公司將為客戶提供高質(zhì)量免疫調(diào)節(jié)復(fù)合物的篩選工作，從而協(xié)助您順利完成藥物的研發(fā)工作。

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▲?篩選參數(shù)靈活選擇
▲?高性價比
▲?操作嚴(yán)謹(jǐn)，數(shù)據(jù)可靠

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免疫調(diào)節(jié)復(fù)合物的篩選服務(wù)
在過去的幾年，InvivoGen公司開發(fā)了一系列在細(xì)胞水平檢測激活或抑制免疫系統(tǒng)的復(fù)合物，這些復(fù)合物通過活化模式識別受體，特別是TLRs，NOD1/2和RIG-1/MDA-5等，來發(fā)揮功能。這些靈敏的細(xì)胞水平實驗通過采用NF-kB誘導(dǎo)的SEAP（分泌型堿性磷酸酶）或IRF（干擾素調(diào)節(jié)因子）誘導(dǎo)的sLUC（分泌型熒光素酶）作為報告基因來進(jìn)行監(jiān)測。細(xì)胞接受外界刺激后，NF-kB或IRF信號通路的活化通過特定檢測試劑來監(jiān)測進(jìn)而提供快速準(zhǔn)確的結(jié)果。
篩選服務(wù)
我們提供兩種服務(wù)選擇，包括復(fù)合物的初步檢測和濃度梯度分析，它們可依次也可分開進(jìn)行。
·復(fù)合物的初步檢測（第一階段）：一系列模式識別受體的單一劑量分析。
只進(jìn)行單一濃度的篩選工作，一般選取原始復(fù)合物或客戶自行提供的樣本按照通用的1：10比例進(jìn)行稀釋。
·復(fù)合物不同劑量測試分析（第二階段）：選取復(fù)合物樣本的三種不同濃度，通常為1：10、1：100和1：1000稀釋比例，來進(jìn)行復(fù)合物激活PRR的活性分析，可根據(jù)客戶要求進(jìn)行定制。

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模式識別受體信號通路的簡明示意圖

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▲?TLR配體的篩選
樣品進(jìn)行人源或者鼠源TLR2,3,4,5,7,8,9的激動劑或拮抗劑功能分析。
▲?NOD1/2配體的篩選
樣品進(jìn)行人源或者鼠源NOD1和NOD2的功能分析。
▲?RIG-1/MDA-5配體的篩選
樣品進(jìn)行人源或者鼠源RIG-1/MDA-5的功能分析。
▲?Dectin-1和Mincle配體的篩選
關(guān)于C型凝集素受體Dectin-1和Mincle配體的分析試劑目前正在研發(fā)后期。

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復(fù)合物的初步檢測案例
樣品溶液按照1：10稀釋后加入HEK-Blue TLR（人源TLR2,3,4,5,7,8,9）和HEK-Blue NOD（人源NOD1和NOD2）細(xì)胞進(jìn)行刺激，同時采取一系列陽性對照：包括100ng/ml Pam3CSK4(TLR2)，1mg/ml的poly (I:C)(TLR3)，100ng/ml的LPS-EK(TLR4)，100ng/ml FLA-ST UP(TLR5)，10mg/ml R848(TLR7/8)，10mg/ml ODN 2006(TLR9)，10mg/ml C12-iE-DAP(NOD1)以及10mg/ml L18-MDP(NOD2)。共同孵育24小時后，通過QUANTI-Blue試劑檢測HEK-Blue細(xì)胞培養(yǎng)上清中堿性磷酸酶SEAP的水平來分析TLR誘導(dǎo)的NF-kB活化情況。
InvivoGen將會提供一份電子版和一份紙質(zhì)版的詳細(xì)分析報告。所有操作步驟都依照嚴(yán)格的流程來進(jìn)行，并對實驗結(jié)果進(jìn)行保密。

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