治療性蛋白質(zhì)的糖基化譜對(duì)其藥理學(xué)性質(zhì)發(fā)揮著重要作用,會(huì)影響免疫原性、藥代動(dòng)力學(xué)和藥效學(xué)。然而,由于目前的手動(dòng)樣品前處理方法復(fù)雜、持續(xù)多日,只能對(duì)開(kāi)發(fā)流程中代表關(guān)鍵決策點(diǎn)的樣品進(jìn)行分析。為了滿足針對(duì)生物仿制藥和新型生物藥物開(kāi)發(fā)日益嚴(yán)格的法規(guī)要求,提供更高的數(shù)據(jù)質(zhì)量和分析通量速度,ProZyme 推出GlykoPrep? 樣品快速制備平臺(tái), GlykoPrep-plus先進(jìn)化學(xué)試劑能夠?qū)崿F(xiàn)快速的N-糖鏈消化、標(biāo)記和凈化,為您提供穩(wěn)定和可重現(xiàn)的定量結(jié)果。
該平臺(tái)主要以AssayMAP?小柱(見(jiàn)右圖)為基礎(chǔ),該小柱包含5μl的填充床,可填充粒徑在20到100μm之間的幾乎所有聚合物、硅膠和凝膠型樹(shù)脂。樣品杯最大樣品承載體積為200μl。 | ? |
?AssayMAP?小柱可放置在特殊的模塊支架上,結(jié)合相關(guān)的接收板和收集板(96孔式),完成樣品的制備收集。實(shí)驗(yàn)時(shí),樣品、緩沖液及其它試劑加入到樣品杯中,通過(guò)微孔板離心機(jī)的低速離心處理,溶液流經(jīng)樹(shù)脂填充床。兩塊板同時(shí)使用,可最多制備192個(gè)樣品。 | ???? ??? |
平臺(tái)特點(diǎn):
● 從純化到聚糖釋放,完成整個(gè)樣本制備流程just 3h, not 3-4 days ● 非選擇性,定量釋放及回收完整的N-聚糖 ● 選擇靈活,可實(shí)現(xiàn)高通量(處理1-192個(gè)樣本) ● 室溫標(biāo)記,無(wú)唾液酸損失,標(biāo)記效率>80% ● 與多種自動(dòng)化平臺(tái)的微孔板液體處理系統(tǒng)兼容??????????????????????????????????????????? | ??? ? |
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?高 效
圖示:采用快速糖樣本制備平臺(tái)制備的N-糖鏈糖類,可標(biāo)記高達(dá)25?μg的糖蛋白(N-糖鏈糖類含量高)。對(duì)于N-糖鏈寡糖含量低的樣本(如IgG,<0.1μg)亦能精確標(biāo)記(圖中未顯示)。
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?重復(fù)性佳
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圖示:某一IgG樣本用該平臺(tái)重復(fù)檢測(cè)96次的結(jié)果。結(jié)果顯示該平臺(tái)制備樣本時(shí)具有很好的重復(fù)性,CV<4%,版圖顯示無(wú)位置偏差。
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平臺(tái)組成:
◆ GlykoPrep? Digestion Module ◆?GlykoPrep? Labeling Module ◆?GlykoPrep? Cleanup Module ? ? ? ? ? ? ? ? | ?? ?應(yīng)用 | ?檢測(cè)方法 | ● 細(xì)胞培養(yǎng)優(yōu)化 ●?菌株篩選 ●?產(chǎn)品表征 ●?質(zhì)量源于設(shè)計(jì)中的工藝過(guò)程分析 ●?質(zhì)量控制 | ●?HPLC ●?LC/MS ●?CE ●?MS ●?HPAEC-PAD | |
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?樣本類型 | ?自動(dòng)化選擇 | ●?單克隆抗體 ●?Fc融合蛋白 ●?其他重組糖蛋白 | ●?手動(dòng)處理 ●?液體處理系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)半自動(dòng)化 ●?全自動(dòng)化 | |
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儀器需求:
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| 1.??Eppendorf??5804離心機(jī)? 2.?Eppendorf?A-2-DWP(5804/10)?轉(zhuǎn)子(高度≥44mm)? 3.?GS150?AssayMAP?干式加熱器及Blocks 4.?Thermo?SPD2010?SpeedVac?離心式真空濃縮儀(可選)?
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耗材需求:
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產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品描述 |
AM200 | AssayMAP???Starter?Labware?Kit |
組分: WS0264?Rack?(pk?of?2) WS0265?Receiver?Plate?(pk?of?2) WS0266?Lid?(pk?of?2)WS0267?Purification?Collection?Plate?(pk?of?2) WS0268?Waste?Plate?(pk?of?2) WS0269?Cleanup?Collection?Plate?(pk?of?2)1?ea? Gilson?D-200?Pipet?Tips?(1?ea) Gilson?15%?coupon |
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實(shí)驗(yàn)原理圖:?
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實(shí)驗(yàn)流程示意圖:?
? ?*?圖:GlykoPrep??Rapid?N-Glycan?Preparation?with?InstantAB?實(shí)驗(yàn)流程
產(chǎn)品類型 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 |
Kit | GlykoPrep??Rapid?N-Glycan?Preparation?with?2-AB | GP96NG-AB | 1?kit |
GlykoPrep???Rapid?N-Glycan?Preparation?with?InstantAA?? | GP96NG-LA | 1?kit |
GlykoPrep??Rapid?N-Glycan?Preparation?with?InstantAB? | GP96NG-LB | 1?kit |
GlykoPrep???Rapid?N-Glycan?Preparation | GP96NG-LF | 1?kit |
GlykoPrep??Rapid?N-Glycan?Preparation?with?2-AB?(24-ct) | GP24NG-AB | 1?kit |
GlykoPrep??Rapid?N-Glycan?Preparation?with?InstantAA??(24-ct) | GP24NG-LA | 1?kit |
GlykoPrep??Rapid?N-Glycan?Preparation?with?InstantAB? | GP24NG-LB | 1?kit |
GlykoPrep??Rapid?N-Glycan?Preparation?(24-ct) | GP24NG-LF | 1?kit |
Individual?Modules | GlykoPrep??Digestion?Module | GS96-RX | 1?ea |
GlykoPrep??Rapid-Reductive-Amination??2-AB?Labeling?Module | GS96-AB | 1?ea |
GlykoPrep??InstantAA??Labeling?Module* | GS96-LA | 1?ea |
GlykoPrep??InstantAB??Labeling?Module* | GS96-LB | 1?ea |
GlykoPrep??Cleanup?Module | GS96-CU | 1?ea |
Protein?A?Cartridges | P50030_KIT | 1?ea |
GlykoPrep??Rapid-Reductive-Amination??2-AB?Labeling?Module?(24-ct) | GS24-AB | 1?ea |
GlykoPrep&trade?Digestion?Module?(24-ct) | GS24-RX | 1?ea |
GlykoPrep??InstantAA??Labeling?Module?(24-ct)* | GS24-LA | 1?ea |
GlykoPrep??InstantAB??Labeling?Module?(24-ct)* | GS24-LB | 1?ea |
GlykoPrep??Cleanup?Module?(24-ct) | GS24-CU | 1?ea |
Protein?A?Cartridges?(24-ct) | P50038 | 1?ea |
Toolkit&?Equipment | Gilson??Single?Channel?Diagnostic?(SD)?TOOLKIT?N-Glycan | 54030001 | 1?kit |
Gilson??Multichannel?Diagnostic?(MD)?TOOLKIT?N-Glycan | 54030002 | 1?kit |
Starter?Labware?Kit | AM200 | 1?ea |
Receiver?Plate?Bulk?Pack?(formerly?P50019) | G5524-60041 | 1?pack |
Cartridge?Rack?Bulk?Pack?(formerly?P50036) | G5524-60042 | 1?pack |
Rack?Lid?Bulk?Pack?(formerly?P50037) | G5527-60043 | 1?pack |
Heater?&?Incubation?Blocks | GS150 | 1?ea |
Heater | WS0271 | 1?ea |
Incubation?Block | WS0272 | 1?ea |
Microplate?Centrifuge | Y-CENTRIFUGE | 1?ea |
Deep?Plate?Rotor | Y-ROTOR | 1?ea |
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*必須與GlykoPrep??Digestion?Module同時(shí)使用,才可發(fā)揮最佳的快速制備效果。