上世紀(jì)60年代初,人們發(fā)現(xiàn)生物素(biotin)與卵白素(avidin)之間具有高度親和力,是自然界中具有最強親和力的物質(zhì)之一。到了70年代人們又發(fā)現(xiàn)生物素可以和抗體交聯(lián),且生物素或卵白素與過氧化物酶或熒光素結(jié)合后,并不影響它們的生物學(xué)活性。從此免疫組化方法進入生物素-卵白素檢測系統(tǒng)時代,其代表如ABC、SP等檢測系統(tǒng),時至今日,它們?nèi)员粡V泛應(yīng)用。ABC方法是美國VECTOR公司最早推出的經(jīng)典產(chǎn)品,它利用生物素和卵白素具有極高的親和性這一生物學(xué)特征,將卵白素和生物素化辣根過氧化物酶按照一定的比例混合,形成ABC復(fù)合物(卵白素-生物素-過氧化物酶)。在生物素化的二抗結(jié)合一抗后,即可與上述ABC復(fù)合物形成抗原-抗體-生物素化二抗-ABC,最后用相應(yīng)的底物顯色。此種方法已經(jīng)沿用了幾十年,得到普遍認可,物美價廉,背景干凈,但缺點是操作比較麻煩,靈敏度沒有不及目前一些新的檢測系統(tǒng)高。?
?????? ABC檢測系統(tǒng)的優(yōu)勢在于可以將抗原抗體結(jié)合位點的信號進行多級放大,使得多種抗體可以應(yīng)用于石蠟切片的檢測。但是這種檢測系統(tǒng)方法也存在缺陷,除了復(fù)雜耗時,難以標(biāo)準(zhǔn)化、對某些抗體檢出率差以外,最大的問題可能是難以避免內(nèi)源性生物素的干擾,造成非特異性背景染色,尤其在人體組織中,肝、腎等組織都有較多的內(nèi)源性生物素,加上目前通用的抗原修復(fù)方法可以激活內(nèi)源性生物素,非特異性背景染色在某些組織的免疫組化染色中不能滿足研究的需要。?
?????? 為了克服這一缺陷,人們想出了多種方法。其中最為巧妙的一種方法是用高分子葡聚糖作為載體將多個二抗分子和酶結(jié)合在一起,使得檢測變得更簡單。Vector公司的ImmPRESS系列產(chǎn)品就是將二抗分子和酶通過高分子葡聚糖聚合在一起而成,可以滿足研究人員更高的需求。
????? Vector生產(chǎn)的ImmPRESS?Universal檢測試劑盒適合于一抗來源于小鼠和兔的免疫化學(xué)染色。試劑盒成分包括:50ml2.5%正常馬封閉血清;50?ml?即用型?ImmPRESS(聚合酶-抗體)試劑。