AllView PAGE Buffer是一種新型的SDS-PAGE蛋白電泳緩沖液。這款緩沖液具有一個(gè)顯著的特點(diǎn)就是能夠在堿性的Laemmli凝膠（Tris-HCl）中分離不同分子量大小的蛋白質(zhì)，類似于“梯度凝膠”的使用。建議使用丙烯酰胺濃度為6%的分離膠和3%的濃縮膠，以分離分子量約在10 kDa至250 kDa的范圍的蛋白。電泳后的聚丙烯酰胺凝膠可直接用于CBB染色、銀染或western印跡。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. 節(jié)省成本和時(shí)間（不需要梯度凝膠）
2. 使用mini?gel只需13分鐘即可完成電泳
3. 適用于之后進(jìn)一步的分析實(shí)驗(yàn):例如CBB染色、蛋白質(zhì)印跡等
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操作步驟：
1. 用超純水將20×的AllView PAGE Buffer稀釋至1×工作液。（例如，取25 ml的AllView PAGE Buffer到475 ml 的超純水中.）
2. 將凝膠放入電泳槽中。
3. 將1×AllView PAGE Buffer注入電泳槽中。
4. 點(diǎn)樣以及加入蛋白marker
5. 開始電泳，電泳條件設(shè)置如下。
| Gel | Voltage | Time |
| Mini gel (8 × 10 cm, 1 mm thick) | 250 V (Constant voltage) | 13-15 min |
注意：
AllView PAGE Buffer適用于Laemmli凝膠（見下文“推薦用法”）。
如果使用預(yù)制凝膠，則最佳丙烯酰胺濃度可能不同。
AllView PAGE Buffer不可重復(fù)使用。
AllView PAGE Buffer是20×原液。使用前請(qǐng)稀釋至1倍工作液。
如果觀察到SDS沉淀，使用前將其放在水?。s37°C）中使其完全溶解。
最佳電泳時(shí)間取決于丙烯酰胺濃度、凝膠大小和電壓。
建議使用MW Marker作為標(biāo)記。(e.g. DynaMarker? Protein MultiColor Stable II, Code#DM660).
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推薦用法：
建議丙烯酰胺的濃度為6%的分離膠和3%的濃縮膠，以分離分子量大概10 kDa至250 kDa范圍的蛋白。特別是在需要分離低分子量蛋白質(zhì)（10kda~30kda）的情況下，建議使用10%的分離膠。
1. 準(zhǔn)備膠 (Laemmli’s method) ?
表1，聚丙烯酰胺分離膠和濃縮膠配方（2 mini gels）
| Stacking gel (6 ml) | Resolving gel (15 ml) |
Gel percentage | 3% | 6% | 10% |
Ultrapure water | 3.9 ml | 8.05 | 6.05 |
1.5M Tris-HCl (pH8.8) | 1.5 | 3.75 | 3.75 |
30% Acrylamide/Bis solution | 0.6 | 3.0 | 5.0 |
10% SDS | 0.06 | 0.15 | 0.15 |
TEMED | 0.003 (3 μl) | 0.00375 (3.75 μl) | 0.00375(3.75 μl) |
10% APS | 0.06 | 0.05 | 0.05 |
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上圖為 DynaMarker? Protein MultiColor Stable II, Code#DM660
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2.電泳圖
AllView PAGE Buffer與Laemmli electrophoresis running buffer（Tris-Glycine-SDS）的使用區(qū)別在于蛋白質(zhì)遷移率不同。通過對(duì)AllView PAGE Buffer和Laemmli gel（Tris-HCl）的結(jié)合使用，可以像梯度凝膠一樣分離大范圍的蛋白質(zhì)大小，如下圖。
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訂購(gòu)信息：
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
DS520 | AllView PAGE Buffer | 500 ml (20 × stock solution) |
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