作為全球領(lǐng)先的核酸修飾專(zhuān)家，TriLink 的修飾性核苷酸在用于藥物研發(fā)的各種技術(shù)中也應(yīng)用廣泛，SELEX技術(shù)便是其中之一。
SELEX，即指數(shù)富集的配體系統(tǒng)進(jìn)化技術(shù)(Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment，SELEX)，是一項(xiàng)用于篩選核酸適配體（Aptamer）的技術(shù)。核酸適配體，是可與蛋白質(zhì)、金屬離子、小分子、多肽甚至整個(gè)細(xì)胞等目的靶標(biāo)進(jìn)行高親和力和特異性結(jié)合的一段寡核苷酸序列（DNA或RNA）。
與抗體相比，極性帶負(fù)電的核酸分子與蛋白結(jié)合時(shí)可以提供更多的氧原子，提供更多的電子對(duì)去產(chǎn)生更多的氫鍵，增加相互作用的鍵能，維持更穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)；另外，核酸適配體與抗體相比具有分子量小，穩(wěn)定性更好，易改造修飾，無(wú)免疫原性，制作周期短，可以通過(guò)人工合成等優(yōu)勢(shì)，免去了動(dòng)物免疫、飼養(yǎng)、蛋白提取和純化等一系列流程。因此，核酸適配體相比抗體，在生化分析，生物醫(yī)療，新藥研發(fā)等方面都有更大的潛力。
SELEX流程：
1.?確定目的靶標(biāo)。（目標(biāo)分子可以是蛋白質(zhì)，小分子或超分子結(jié)構(gòu)，甚至細(xì)胞。）
2.?構(gòu)建隨機(jī)寡核苷酸（~1 x 10?15個(gè)寡核苷酸）文庫(kù)。
3.?靶標(biāo)與文庫(kù)核酸共孵育。
4.?去除未結(jié)合的核酸片段，而結(jié)合的那些片段進(jìn)行擴(kuò)增后，進(jìn)行下一輪篩選。
5.?通過(guò)該過(guò)程，將與靶標(biāo)有高親和力的寡核苷酸從數(shù)萬(wàn)億的數(shù)量中篩選出來(lái)。
6.?對(duì)最終篩選出的適配體進(jìn)行分類(lèi)，純化、測(cè)序以及后期修飾。
適配體的后期修飾，可以使適配體更加穩(wěn)定性，并鞏固適配體與目的靶標(biāo)的親和力，且進(jìn)行了熒光等功能團(tuán)修飾的適配體還可以用于檢測(cè)和固定目的靶標(biāo)。Trilink的2'-Fluoro-dCTP（目錄號(hào)N-1008）和2'-Fluoro-dUTP（目錄號(hào)N-1010）就經(jīng)常被用于適配體的修飾。這些修飾類(lèi)型提高了適體的穩(wěn)定性，使其對(duì)核酸內(nèi)切酶降解的抵抗力增強(qiáng)。
由SELEX衍生的PhotoSELEX技術(shù)使用5-溴-2'-脫氧尿苷-5'-三磷酸酯（Br-dU）（TriLink目錄號(hào)N-2008）代替標(biāo)準(zhǔn)的胸苷。除了通過(guò)空間構(gòu)象與目的靶標(biāo)結(jié)合，修飾適配體的Br-dU殘基和靶標(biāo)的酪氨酸之間也存在共價(jià)鍵。Br-dU修飾的寡核苷酸暴露于輻射中時(shí)，處于正確構(gòu)象的寡核苷酸與靶分子上的特定位點(diǎn)共價(jià)交聯(lián)。該技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的高通量檢測(cè)。
SELEX只是修飾核苷酸的眾多應(yīng)用之一。TriLink提供了可用于多種研究目的的修飾核苷酸。
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