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Tau 和 Alpha突觸核蛋白共聚集體原纖維

2023-07-13
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Tau 和 Alpha突觸核蛋白共聚集體原纖維


Tau 和 Alpha突觸核蛋白共聚集體原纖維

SPR-494,重組人Tau-352 (胚

胎 0N3R) 和 Alpha 突觸核蛋白

共聚集體原纖維

? StressMarq的共聚集體原纖維

是用兩種蛋白的單體共同孵育

形成的原纖維

? Tau 和 Asyn蛋白存在于同一條

纖維上

Tau 和 Alpha突觸核蛋白共聚集體原纖維

Tau-352 (胚胎 0N3R) 和

Alpha 突觸核蛋白共聚集體

原纖維(SPR-494)既可以

聚集Asyn單體也可以聚集

Asyn和Tau 蛋白單體的混合

? Tau蛋白單體也可以被聚集,

但是ThT信號(hào)不明顯

Tau 和 Alpha突觸核蛋白共聚集體原纖維

SPR-495,重組人Tau-441

(2N4R) 和 Alpha 突觸核蛋白共

聚集體原纖維

? StressMarq的共聚集體原纖維

是用兩種蛋白的單體共同孵育

形成的原纖維

? Tau 和 Asyn蛋白存在于同一條

纖維上

Tau 和 Alpha突觸核蛋白共聚集體原纖維

Tau-441 (2N4R) 和 Alpha 突

觸核蛋白共聚集體原纖維

(SPR-495)既可以聚集

Asyn單體也可以聚集Asyn和

Tau 蛋白單體的混合物

? Tau蛋白單體也可以被聚集,

但是ThT信號(hào)不明顯

Tau 和 Alpha突觸核蛋白共聚集體原纖維

Tau & Alpha 突觸核蛋白共聚集體原纖維

的免疫電鏡圖。6nm 膠體金信號(hào)來自α突

觸核蛋白,12nm 膠體金信號(hào)來自tau蛋

白。可看到兩種信號(hào)同時(shí)出現(xiàn)在SPR-494

和SPR-495的單條纖維上。而對(duì)照組不會(huì)

同時(shí)出現(xiàn)兩種信號(hào)。

實(shí)驗(yàn)方法:原纖維被吸附到碳涂層銅網(wǎng)格上。網(wǎng)格用含1% BSA 和 0.1% Tween-20 的PBS 封閉,洗滌,然后依次在封閉緩沖液中用 20 μg/mL 的一抗孵育,洗滌,再在封閉緩沖液中用 20 μg/mL 的二抗孵育,洗滌并用2% 乙酸雙氧鈾作為負(fù)染色。 6nm(asyn)和 12nm(tau)信號(hào)同時(shí)出現(xiàn)在共聚集體原纖維樣品的同一原纖維鏈中,并且在對(duì)照 α- 突觸核蛋白或 tau 原纖維中未觀察到抗體交叉反應(yīng)。一抗:小鼠抗人asyn單克隆抗體(StressMarq SMC-532)和兔抗人tau多克隆抗體(StressMarq SPC-802);二抗:6nm 膠體金標(biāo)記的山羊抗小鼠抗體 (Jackson ImmunoResearch 115-195-146) 和 12nm膠體金標(biāo)記的山羊抗兔抗體 (Jackson ImmunoResearch 115-195-146)。



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