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細(xì)胞增殖研究中使用alamar Blue的3個(gè)理由

2022-11-23
瀏覽次數(shù): 283

如果您使用增殖細(xì)胞作為研究的一部分,您將知道監(jiān)測(cè)其生長(zhǎng)速度的重要性。培養(yǎng)中的細(xì)胞以異常速率分裂,可能表明其生長(zhǎng)條件出現(xiàn)問題,并可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性,更不用說留給您的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞太少了。

細(xì)胞增殖研究中使用 alamar Blue 的 3 個(gè)理由


除了監(jiān)測(cè)培養(yǎng)中的細(xì)胞生長(zhǎng)外,許多實(shí)驗(yàn)還旨在比較以不同方式處理的細(xì)胞群的增殖或健康狀況。例如,您可能想知道通過比較處理和未處理細(xì)胞的增殖來了解新候選藥物對(duì)細(xì)胞分裂速率的影響。這些實(shí)驗(yàn)是如此常規(guī),因此擁有一種每次都可以使用的簡(jiǎn)單、可靠的方法非常重要。訪問科學(xué)文檔、方案、故障排除建議和其他資源對(duì)于確保您從所選方法中獲得最佳效果也至關(guān)重要。值得慶幸的是,有各種各樣的工具和技術(shù)可用于跟蹤細(xì)胞生長(zhǎng),最好的細(xì)胞增殖體外檢測(cè)器之一是 alamarBlue。我們將解釋了什么是 alamarBlue 以及它是如何工作的,然后探討了這種試劑的三個(gè)主要優(yōu)點(diǎn)。我們還將向您介紹有用的資源,以支持您使用 alamarBlue 的學(xué)習(xí)。


什么是 alamarBlue?

alamarBlue 含有細(xì)胞滲透性,無毒的 REDOX 指示染料刃天青。響應(yīng)細(xì)胞代謝,染料的顏色從弱熒光藍(lán)色變?yōu)閺?qiáng)熒光粉紅色(圖 1)。粉紅色熒光的強(qiáng)度與活的呼吸細(xì)胞的數(shù)量成正比; 因此,AlamarBlue 是細(xì)胞健康的直接指標(biāo)。

細(xì)胞增殖研究中使用 alamar Blue 的 3 個(gè)理由


為何建議您使用 alamarBlue 進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測(cè)呢?


優(yōu)勢(shì)一:alamarBlue 無毒

與其他增殖試劑相比,alamarBlue 不會(huì)干擾電子傳遞鏈或影響細(xì)胞呼吸或功能,因此無毒且使用安全(O'Brien 等人,2000)。這也意味著 alamarBlue 可能比有毒化合物更容易獲得,用于教學(xué)實(shí)驗(yàn)室和項(xiàng)目學(xué)生的實(shí)驗(yàn)室。與有毒增殖劑不同,暴露于 alamarBlue 的細(xì)胞保持功能齊全,存活和健康,不受指示劑存在的影響。結(jié)合您不需要裂解細(xì)胞來測(cè)量 alamarBlue 活性的事實(shí),您可以在測(cè)量增殖后保持細(xì)胞生長(zhǎng),并在以后的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行重復(fù)測(cè)量。這使得 alamarBlue 適合長(zhǎng)期的時(shí)間課程研究。


優(yōu)勢(shì) 2:alamarBlue 使用簡(jiǎn)單

alamarBlue 的工作流程很簡(jiǎn)單:將試劑添加到細(xì)胞中,孵育并測(cè)量(圖 2)。作為一種高度信任和引用的化合物,許多實(shí)用的建議、方案和已發(fā)表的實(shí)驗(yàn)可以為您提供支持。alamarBlue 與多種培養(yǎng)基兼容,因此在添加 alamarBlue 之前,您不需要更換細(xì)胞培養(yǎng)基。哺乳動(dòng)物細(xì)胞需要在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)條件下與 alamarBlue 一起孵育至少 1-4 小時(shí):在 37°C 和 pH 6.8 至 7.4 之間。作為細(xì)胞增殖讀數(shù)的顏色變化可以使用熒光或吸光度進(jìn)行測(cè)量,以最適合您的實(shí)驗(yàn)室為準(zhǔn)。在 570nm 和600nm 處監(jiān)測(cè)吸光度,在 530-560nm 激發(fā)波長(zhǎng)和 590nm 發(fā)射波長(zhǎng)處監(jiān)測(cè)熒光。然后,您可以使用簡(jiǎn)單的 alamarBlue 計(jì)算器來處理數(shù)字并指示細(xì)胞在時(shí)間范圍內(nèi)生長(zhǎng)的速度。

細(xì)胞增殖研究中使用 alamar Blue 的 3 個(gè)理由

優(yōu)勢(shì) 3:alamarBlue 靈活

alamarBlue 的靈活性是它被廣泛使用并作為增殖劑受到如此高度信任的另一個(gè)主要原因(它在PubMed 上有超過 3,000 次引用)。訂購(gòu)一種試劑并將其用于各種實(shí)驗(yàn)總是更容易,而不是在方案之間來回切換。


除了培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞外,alamarBlue 還適用于其他細(xì)胞類型,包括細(xì)菌,酵母,真菌和原生動(dòng)物,并且與貼壁或懸浮細(xì)胞兼容。alamarBlue 也可用于細(xì)胞計(jì)數(shù)低的實(shí)驗(yàn),能夠檢測(cè)培養(yǎng)物中少至 50 個(gè)細(xì)胞!它適合與酚紅一起使用,它只是稍微改變了測(cè)量值。alamarBlue 是廣泛應(yīng)用的不錯(cuò)選擇,包括細(xì)胞增殖測(cè)定、相對(duì)細(xì)胞毒性生物測(cè)定和細(xì)胞因子測(cè)定。


alamarBlue 的靈活性延伸到實(shí)用優(yōu)勢(shì)。由于 alamarBlue 是水溶性的,因此不需要洗滌/固定或提取步驟。如果在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的當(dāng)天無法讀取板,您可以將它們冷藏在塑料或鋁箔包裝中并在 1-3 天內(nèi)讀取它們,讓您在方便時(shí)讀取板,這可能有助于避免長(zhǎng)時(shí)間在實(shí)驗(yàn)室!


探索 alamarBlue 的魅力


我們已經(jīng)描述了我們喜歡 alamarBlue 的三個(gè)主要原因,以及它如何為您的細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)增加價(jià)值。您可以在我們的專用資源頁(yè)面上找到更多原因,說明為什么它可以成為您實(shí)驗(yàn)室的重要試劑,以及使用 alamarBlue 所需的所有工具。


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References

O’Brien J et al. (2003). Investigation of the Alamar Blue (resazurin) fluorescent dye for the

assessment of mammalian cell cytotoxicity. The FEBS Journal, 267, 5421-5426.


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