Cayman cGMP測(cè)定法是一種競(jìng)爭(zhēng)性ELISA，可用于直接從細(xì)胞裂解液、組織勻漿、血漿或尿液中定量檢測(cè)cGMP。檢測(cè)范圍為0.23-30 pmol/ml，靈敏度(80%B/Bo)約為1 pmol/ml。
本實(shí)驗(yàn)是基于游離cGMP和AChE結(jié)合物(cGMP示蹤劑)對(duì)有限數(shù)量的cGMP特異性兔抗體結(jié)合位點(diǎn)的競(jìng)爭(zhēng)。因?yàn)閏GMP示蹤劑的濃度是恒定的，而cGMP的濃度是變化的，所以能夠與兔抗體結(jié)合的cGMP示蹤劑的數(shù)量將與孔中cGMP的濃度成反比。
(上圖為乙酰膽堿酯酶催化的反應(yīng))
背景
鳥苷3'，5'環(huán)單磷酸(cGMP)是一種關(guān)鍵的細(xì)胞內(nèi)第二信使分子，在各種激素和藥物的反應(yīng)中負(fù)責(zé)細(xì)胞信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)。cGMP是由GTP通過膜結(jié)合和可溶性的鳥苷酸環(huán)化酶合成的。顆粒型鳥苷酸環(huán)化酶包含cGMP催化結(jié)構(gòu)域和細(xì)胞表面受體功能。在哺乳動(dòng)物中，已經(jīng)確定了六種膜形式(GC-A-F)，其中只有三種具有已知的配體。
可溶性鳥苷酸環(huán)化酶是由α(α1或α2)和β(β1或β2)亞基組成的異源二聚體。α1/β1異源二聚體被內(nèi)源性一氧化氮nM濃度激活數(shù)百倍，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)cGMP的積累。cGMP控制的下游介質(zhì)包括cGMP門控通道、cGMP依賴激酶和cGMP調(diào)節(jié)的磷酸二酯酶。特定細(xì)胞中cGMP的相對(duì)豐度可以作為激動(dòng)劑激活的標(biāo)志，激動(dòng)劑通過顆粒型鳥苷酸環(huán)化酶作用于細(xì)胞表面，或一氧化氮在細(xì)胞內(nèi)激活可溶性鳥苷酸環(huán)化酶。
環(huán)GMP酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒產(chǎn)品信息：
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