在全球新冠疫情的背景下，Biontech和Moderna等公司的mRNA 疫苗取得了較好的預(yù)防效果，使得mRNA疫苗受到了極大的關(guān)注。mRNA疫苗研發(fā)過程中，遞送系統(tǒng)是制約該產(chǎn)業(yè)發(fā)展的瓶頸，比較好的mRNA遞送系統(tǒng)能夠協(xié)助mRNA疫苗高效遞送，有較好的體內(nèi)效果。Mirus?Mir2250可以用于前期細胞水平上mRNA轉(zhuǎn)染實驗的研究，該款試劑特異性用于mRNA的體外轉(zhuǎn)染，低毒高效。?
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產(chǎn)品介紹
TransIT?-mRNA 轉(zhuǎn)染試劑盒主要用于將RNA轉(zhuǎn)染到細胞中，該產(chǎn)品毒性較低，轉(zhuǎn)染的細胞種類廣泛。RNA的轉(zhuǎn)染避免了轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用，直接將RNA傳遞到細胞質(zhì)中進行表達。TransIT?-mRNA轉(zhuǎn)染試劑盒可用于遞送多種RNA分子，包括mRNA和病毒RNAs?(2 - 10 kb)。TransIT?-mRNA 轉(zhuǎn)染試劑盒有多種應(yīng)用，如短期蛋白表達，病毒生產(chǎn)和復(fù)制研究。??
TransIT?-mRNA轉(zhuǎn)染試劑盒包含TransIT?-mRNA試劑和mRNA Boost試劑兩部分。本試劑盒在不需要改變培養(yǎng)基的情況下，可以在存在血清的情況下進行轉(zhuǎn)染，并得到最佳轉(zhuǎn)染效果。
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產(chǎn)品特性?
低細胞毒性-維持細胞密度，減少實驗偏差
高效傳遞-實現(xiàn)RNA在大量細胞中的傳遞，確保實驗成功
血清兼容-在存在血清的情況下進行轉(zhuǎn)染，無需改變培養(yǎng)基并保持細胞健康
提供各種大小的RNA -理想的專門應(yīng)用，如病毒生產(chǎn)，蛋白質(zhì)表達和CRISPR基因組編輯
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Mirus ?TransIT?-mRNA 轉(zhuǎn)染試劑盒常見規(guī)格
| TransIT?-mRNA轉(zhuǎn)染?試劑 | mRNA Boot 試劑 |
MIR?2225 | 1 × 0.4ml | 1 × 0.4ml |
MIR?2250 | 1 × 1.0ml | 1 × 1.0ml |
MIR?2255 | 5?× 1.0ml | 5?× 1.0ml |
MIR?2256 | 10?× 1.0?ml | 10?× 1.0?ml |
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Mirus ?TransIT?-mRNA轉(zhuǎn)染試劑盒數(shù)據(jù)和文獻?
Cas9 mRNA +引導(dǎo)RNA寡核苷酸的高效基因組編輯。
HEK?293T/17、U2OS和NHDF細胞共轉(zhuǎn)染0.5μg的Cas9編碼mRNA, 5meC， ψ (Trilink Biotechnologies)和25nM的PPIB靶向2部分gRNA (Dharmacon)，使用TransIT?-mRNA轉(zhuǎn)染試劑盒(mRNA Reagent和Boost, Mirus Bio, 24孔板0.5μl/孔)。用T7E1錯配檢測方法測量轉(zhuǎn)染后48小時的切割效率。
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(2)TransIT?-mRNA Transfection Kit轉(zhuǎn)染GFP mRNA到DC 2.4樹突狀細胞。?
使用TransIT?-mRNA轉(zhuǎn)染試劑盒，用(A) 0.5μg，(B) 1μg和(C) 2.5μg的戴帽和聚腺苷酸化的mRNA編碼的GFP，用1μl TransIT?-mRNA Reagent和1μl Boost轉(zhuǎn)染DC 2.4細胞。細胞在24孔板中以100,000個細胞/孔培養(yǎng)過夜。轉(zhuǎn)染后10小時拍攝圖像。
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使用TransIT?-mRNA轉(zhuǎn)染試劑盒轉(zhuǎn)染熒光素酶mRNA后的高水平熒光素酶表達。
使用TransIT?-mRNA轉(zhuǎn)染試劑盒對12孔板中的細胞進行轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染戴帽和聚腺苷化的mRNA編碼熒光素酶。轉(zhuǎn)染后大約18小時，收集細胞，并測定每孔熒光素酶的總活性。
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轉(zhuǎn)染實驗操作流程?
轉(zhuǎn)染流程包括培養(yǎng)細胞，制備TransIT-mRNA 試劑:mRNA Boost:RNA復(fù)合物，將復(fù)合物添加到完全生長培養(yǎng)基中的細胞中，具體操作流程和相關(guān)問題解決方案可參考說明書。（https://www.mirusbio.com/products/transfection/transit-mrna-transfection-kit#product:MIR%202250）
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