產(chǎn)品信息
貨號:tlrl-pglps
產(chǎn)品包裝
- 1 mg 脂多糖
- 1.5 ml無內(nèi)毒素水
產(chǎn)品描述
LPS-PG是從革蘭氏陰性菌Porphyromonas gingivalis(牙齦卟啉單胞菌)分離得到的脂多糖(LPS),LPS是革蘭氏陰性菌重要的組成成分,可活化天然免疫系統(tǒng),LPS-PG是引起牙周疾病的重要毒力因子。
LPS的識別主要是由TLR4調節(jié)的,TLR4對LPS-PG的應答依賴于兩個關鍵因子CD14和MD2。
LPS-PG具有一個獨特的異質化學結構,可與其他腸道細菌來源的LPS區(qū)別開來。LPS-PG對于TLR4缺陷的C3H/HeJ小鼠具有活性,人們普遍認為LPS-PG是TLR2的配體。但是,對于LPS-PG結構和功能的研究發(fā)現(xiàn)其是通過TLR4激活細胞的。LPS-PG激活TLR2是由于脂蛋白污染造成的。
質量控制
- 使用HEK-Blue? TLR4細胞質控TLR4活性?
- 使用HEK-Blue? TLR2細胞控質控其他細菌成分(如脂蛋白)的存在
運輸及保存
- 室溫運輸
- 到貨后,需在-20℃保存
- 溶解后的LPS-PG可在4℃保存1個月或者-20℃保存6個月
使用方法
1. 制備儲存液 (1 mg/ml)?
加入1 ml無內(nèi)毒素水制備1 mg/ml LPS-PG儲存液,混合均勻后分裝儲存液,冷藏或冷凍保存,進一步稀釋使用水進行稀釋。
2. 工作濃度
TLR4 activity: 100 ng - 10 μg/ml?
TLR2 activity: 10 ng/ml - 10 μg/ml?
3. 激活TLR2 & TLR4
分別使用HEK-Blue? TLR2 細胞和HEK-Blue? TLR4細胞來檢測TLR2和TLR4被LPS-PG激活的情況。HEK-Blue? TLR細胞穩(wěn)定表達NF-kB誘導的secreted embryonic alkaline phosphatase (SEAP)并過表達一個TLR基因。?
- 在96孔板中加入20μl不同濃度(10 ng - 10 μg/ml)的LPS-PG?
- 在96孔板中加入180μl HEK-Blue? TLR細胞上清
- 在37°C, 5% CO2條件下反應6 - 24 h?
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