7-AAD?細胞活性分析試劑盒 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 產品編號: 10009856
Cayman提供的7-AAD細胞活性分析試劑盒，以7-AAD為熒光探針標記死細胞。7-AAD熒光染料不能進入活細胞但可進入受損細胞或死細胞，進而標記其DNA。雖7-AAD熒光強度不如PI，但其最大發(fā)射光波長較長(激發(fā)光波長488nm,?發(fā)射光波長650nm),?與PE或FITC發(fā)射光譜疊加較小。因此，7-AAD非常適用于同時用FITC或PE標記檢測細胞表面分子或胞內抗原的實驗。
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?400201 | ?Cell-Based?Assay?7-AAD?Staining?Stock?Solution(1,000X) | ?1?Vials/50ul | ?4℃ |
?400202 | ?7-AAD?Assay?Fixative/Actinomycin?D?Solution | ?1?Vials/50ul | ?4℃ |
?10009322 | ?Cell-Based?Assay?Buffer?Tablet | ?4?Tablets | ?Room?Temperature |
7-AAD/CFSE?細胞介導的細胞毒性檢測試劑盒 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 產品編號:?600120
Cayman提供的7-AAD/CFSE?細胞介導的細胞毒性檢測試劑盒利用CFSE標記靶細胞，7-AAD標記死細胞。通過標記可區(qū)分四個細胞群。該試劑盒可快速簡便的在單細胞水平檢測免疫細胞的細胞毒性效應。
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?400201 | ?Cell-Based?Assay?7-AAD?Staining?Stock?Solution(1,000X) | ?2?Vials/50ul | ?4℃ |
?600121 | ?CFSE?Stock?Solution | ?1?Vials/100ul | ?-20℃ |
?10009322 | ?Cell-Based?Assay?Buffer?Tablet | ?4?Tablets | ?Romm?Temperature |
Annexin?V-FITC凋亡檢測試劑盒 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?產品編號: 600120
細胞凋亡早期的特點之一就是細胞膜磷脂的重新分布，?如磷脂酰絲氨酸和磷脂酰乙醇胺從脂雙層的內膜外翻，從而暴露于細胞表面。磷脂酰絲氨酸殘基的外翻，可通過其高親和力的結合蛋白Annexin?V進行檢測。Cayman研發(fā)的Annexin?V凋亡檢測試劑盒利用FITC標記的Annexin?V作為探針，檢測凋亡細胞膜外翻的磷脂酰絲氨酸。
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圖.?星孢菌素（Staurosporine）誘導RAW?264.7細胞凋亡。
凋亡空泡(Apoptosis?Blebs)檢測試劑盒 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?產品編號: 600120
Cayman開發(fā)的凋亡空泡(Apoptosis?Blebs)檢測試劑盒，?利用一個抗體單鏈可變片段的重組蛋白來進行檢測，該抗體偏好性結合凋亡細胞膜空泡的自身抗原。該重組蛋白與蛋白A融合，再通過熒光標記的兔IgG進行檢測。
圖.?A:?凋亡空泡(綠色)；B:?死細胞(紅色)；C:?凋亡空泡(綠色);?D:?細胞經星孢菌素處理，從凋亡到死細胞(橙色)自噬/細胞毒性雙染試劑盒 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 產品編號：?600140
Cayman提供的自噬/細胞毒性雙染試劑盒是在細胞水平研究細胞自噬和細胞毒性調控的便捷工具，試劑盒利用甲丹磺酰尸胺(monodansylcadaverine,?MDC)自發(fā)熒光,?標記培養(yǎng)細胞的自噬泡結構。
圖.?他莫昔芬(Tamoxifen)提高HepG2細胞自噬水平。?A:?HepG2細胞經Vehicle處理,?MDC染色(對照)；B：HepG2細胞經Vehicle處理,?PI染色(對照);?C：HepG2細胞經10uM的Tamoxifen,?MDC染色；D:?HepG2細胞經10uM的Tamoxifen,?PI染色結果。
Caspase-3熒光檢測試劑盒? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??產品編號: 10009135
Caspase?(Cysteine-requiring?Aspartate?Protease)是一個在細胞凋亡過程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase?3也稱CPP32，Yama或apopain，有時被寫作caspase-3或caspase3，屬于caspase家族的CED-3亞家族?(CED-3?subfamily)，是細胞凋亡過程中的一個關鍵酶。?Caspase?3是哺乳動物細胞中研究最多的一個caspase酶。?Cayman研發(fā)的此款試劑盒利用Caspase-3催化其特異性底物?N-Ac-DEVD-N’-MC-R110，?產生高強度熒光產物，可在485nm下被激發(fā)，發(fā)射光為535nm。同時，試劑盒也提供有活性的Caspase-3作為陽性對照。
細胞周期時相?(Cell?Cycle?Phase)?檢測試劑盒 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?產品編號:?10009349
Cayman提供的此款細胞周期時相檢測試劑盒，可用于研究懸浮細胞樣本中細胞周期進程的誘導和抑制。實驗中涉及細胞的固定和破膜處理，可實現(xiàn)在完整細胞中利用PI對其DNA進行染色。
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?10009957 | ?Propidium?Iodide?Reagent,powder | ?1?vial/1mg | ?4℃ |
?10009322 | ?Cell-Based?Assay?Buffer?Tablet | ?2Tablets | ?Room?Temperature |
?10009959 | ?Rnase?A?Solution | ?1?vial/1ml | ?-20℃ |
?10009960 | ?CellCycle?Phase?Determination?Fixative | ?1?vial/100ml | ?Room?Temperature |
CFSE細胞分裂檢測試劑盒 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 產品編號: 10009853
CFDA?SE的全稱為羧基二乙酸熒光素琥珀酰亞胺酯(Carboxyfluorescein?diacetate,?succinimidyl?ester)。CFDA?SE可以通透細胞膜，進入細胞后可以被細胞內的酯酶(esterase)催化分解成CFSE，并保留于細胞內。?由于CFDA?SE標記細胞的熒光非常均勻和穩(wěn)定，每分裂一次子代細胞的熒光會減弱一半，這樣通過流式細胞儀檢測就可以檢測出沒有分裂的細胞，分裂一次的細胞(1/2的熒光強度)，分離兩次的細胞(1/4的熒光強度)，分裂三次的細胞(1/8的熒光強度)以及類似的其它分裂次數(shù)的細胞。在熒光減弱到未染色細胞的背景信號前，可檢測分裂達8次的細胞。
圖.?人外周血淋巴細胞增殖。A-C:?CFSE標記的淋巴細胞（Day0,?Day3,?Day6）
JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 產品編號: 10009172
JC-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位(mitochondrial?membrane?potential)??Ψm?的理想熒光探針。JC-1有單體和多聚體兩種存在狀態(tài)，在低濃度時以單體的形式存在，高濃度時以多聚體形式存在，兩者的發(fā)射光譜不同。在健康細胞中線粒體膜電位較高時，JC-1聚集在線粒體的基質(matrix)中，形成聚合物?(J-aggregates)，可以產生紅色熒光；在線粒體膜電位較低時，JC-1不能聚集在線粒體的基質中，此時JC-1為單體(monomer)，可以產生綠色熒光。?因此可方便地通過熒光顏色的轉變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。通過JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉變可以很容易地檢測到細胞膜電位的下降，同時也可用JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉變作為細胞凋亡早期的一個檢測指標。
圖.?星形孢菌素(staurosporine)對Jurkat細胞線粒體膜電位的影響。A：?未經星形孢菌素處理的細胞大多數(shù)具J-聚合物(紅色)；B:?經星形孢菌素處理的細胞由于線粒體膜低電位，而被染成綠色。
LDH細胞毒性檢測試劑盒 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 產品編號: 10008882
LDH是一種可溶性的胞漿酶，在細胞凋亡或壞死導致細胞膜完整性喪失時，LDH從胞漿釋放至細胞培養(yǎng)基中。因此，LDH的活性作為細胞膜完整性的一個檢測指標，通常也作為評估化學物質或環(huán)境毒性因子的細胞毒性的檢測方法。Cayman提供的LDH細胞毒性檢測試劑盒可用于檢測細胞培養(yǎng)基中LDH的活性，通過兩步反應，產生有色產物-甲臢(formazan),?吸光度490-520nm。
多參數(shù)(Multi-Parameter)凋亡檢測試劑盒 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 產品編號: 600330
Multi?Parameter?Apoptosis?Assay?kit聯(lián)合使用4種不同的試劑，同時檢測多種凋亡事件。該獨特的試劑盒利用FITC-Annexin?V結合物作為探針檢測質膜不對稱性，用TMRE作為探針檢測線粒體膜電位，用7-AAD作為膜通透性/細胞活力指示劑，再用Hoechst染料展示細胞核形態(tài)。
圖.?星形孢菌素(staurosporine)誘導Jurkat細胞凋亡，細胞核形態(tài)變化、線粒體膜電位降低以及Annexin?V-FITC標記的陽性細胞升高。圖A-C為對照，圖D-F為星形孢菌素處理。Hoechst染色顯示大多數(shù)對照細胞具有完整的圓形細胞核(A)，?而星形孢菌素處理的細胞則大多數(shù)呈濃縮、片段化的細胞核。TMRE染色顯示大多數(shù)對照細胞線粒體膜電位未受干擾(B)，?而星形孢菌素處理的細胞膜電位降低，未被染色。大多數(shù)對照細胞Annexin?V染色陰性(C)，而處理組細胞染色大多數(shù)呈陽性，表明細胞正經歷凋亡。
MTT細胞增殖檢測試劑盒 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?產品編號: 10009365
Cayman提供的MTT細胞增殖檢測試劑盒可用于在任何體外模型中研究細胞增殖的誘導和抑制。也可用于篩選參與細胞周期調控的候選藥物。在實驗中，MTT被細胞攝入，經胞內NAD(P)H-氧化還原酶催化還原為甲臢(formazan)?。該實驗可在3-4個小時內完成，無需洗滌步驟。
WST-1細胞增殖檢測試劑盒 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?產品編號: 10008883
WST-1是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細胞增殖越多越快，則顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺。WST-1是MTT的一種升級替代產品，和MTT或其它MTT類似產品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點。試劑盒也可用于篩選參與細胞周期調控的候選藥物。
WST-8細胞增殖檢測試劑盒 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?產品編號: 10010199
WST-8?(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)，在電子耦合試劑1-Methoxy?PMS存在的情況下能夠被還原成橙黃色水溶性的formazan。WST-8被細胞內脫氫酶生物還原后生成的formazan能夠溶解在組織培養(yǎng)基中，生成的formazan量與活細胞數(shù)量成正比。實驗的靈敏度比其它四唑鹽如MTT,?XTT,?MTS或WST?-1高。由于WST-8相當穩(wěn)定，并且對細胞沒有毒性，可直接加入到細胞樣品中長時間孵育。
XTT細胞增殖檢測試劑盒 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 產品編號:?10010200
XTT化學名:2,3-bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenylamino)?carbonyl]?-2H-tetrazolium?hydroxide，作為線粒體脫氫酶的作用底物，被活細胞還原成水溶性的橙黃色產物formazan。當XTT與電子偶合劑（例如PMS）聯(lián)合應用時，其所產生的水溶性的formazan產物的吸光度與活細胞的數(shù)量成正比。檢測快速、靈敏度高，甚至可以測定較低細胞密度，重復性優(yōu)于MTT。試劑盒也可用于篩選參與細胞周期調控的候選藥物。
Perfecta?3D?培養(yǎng)細胞活力檢測試劑盒 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 產品編號: 600990
Cayman研發(fā)的此款?3D?培養(yǎng)細胞活力檢測試劑盒是基于3D?Biomatrix公司的細胞培養(yǎng)平臺。?Perfecta3D?懸滴板是一個新的三維細胞培養(yǎng)平臺，能夠在多孔板模式中形成大小均勻的球狀體懸滴；這種懸滴是細胞自組裝形成的球狀細胞簇，是三維（3D）細胞培養(yǎng)和篩選中研究的最有利的模型之一。同其他類型的3D支架和水凝膠等方法相比，這種球狀體具有簡單性，可重復性以及生理組織的相似性，能模擬組織腫瘤固有的代謝（氧氣、二氧化碳、養(yǎng)分、廢物）和增殖梯度變化。作為優(yōu)良的生理腫瘤模型可以提供比2D細胞培養(yǎng)更可靠的結果。細胞增殖檢測通過檢測WST-1還原為formazan的反應。?
【導讀】三維培養(yǎng)細胞活性及毒性檢測???
Assays?For?Three?Dimensional?Cell?Spheroid?Cultures???細胞培養(yǎng)于懸滴(hanging?drop),?自組裝形成球狀細胞簇。?Cayman采用3D?Biomatrix公司的3D細胞培養(yǎng)平臺，開發(fā)出了兩款全新的試劑盒用于研究Perfecta3D?培養(yǎng)板上的球狀體(spheroid)細胞。即Perfecta3D?細胞活力檢測試劑盒及Perfecta3D?細胞毒性檢測試劑盒，可快速精準的檢測球狀體的一些基本細胞過程。
研究復雜的細胞和組織，及其信號傳導與調控可不是件容易事。而模擬細胞或組織環(huán)境，建立最接近體內天然條件的實驗系統(tǒng)同樣困難。這就是3D細胞培養(yǎng)所面臨的挑戰(zhàn)，3D培養(yǎng)系統(tǒng)旨在更好的模擬細胞的體內生長環(huán)境。近來越來越多的證據表明，3D細胞培養(yǎng)系統(tǒng)比傳統(tǒng)2D培養(yǎng)系統(tǒng)更貼近體內的生理條件。美國3D?Biomatrix公司生產的Perfecta3D?懸滴板是一個新的三維細胞培養(yǎng)平臺，能夠在多孔板模式中形成大小均勻的球狀體懸滴；這種懸滴是細胞自組裝形成的球狀細胞簇，是三維（3D）細胞培養(yǎng)和篩選中研究的最有利的模型之一。同其他類型的3D支架和水凝膠等方法相比，這種球狀體具有簡單性，可重復性以及生理組織的相似性，能模擬組織腫瘤固有的代謝（氧氣、二氧化碳、養(yǎng)分、廢物）和增殖梯度變化。作為優(yōu)良的生理腫瘤模型可以提供比2D細胞培養(yǎng)更可靠的結果。?
圖1.?Perfecta3D?懸滴培養(yǎng)板促進細胞球體在懸滴中的培養(yǎng)。用移液器將細胞懸液加入每個孔，細胞自組裝形成的球狀細胞簇。
應用一.?細胞活性檢測在細胞研究中，對細胞活性及細胞毒理的檢測是一項基本的細胞學技術?，通常采用WST-1法。WST-1是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的可溶性formazan鹽。Formazan產物的吸光度與活細胞的數(shù)量及活性成正比。
Cayman開發(fā)的Perfecta3D?細胞活力檢測試劑盒（產品編號：600990）,?提供3D細胞培養(yǎng)板、WST-1試劑、?電子媒介體溶液（Electron?Mediator?Solution）以及分析用的圓底板。如圖2所示，HEK293細胞以不同細胞密度培養(yǎng)于懸滴中，設置Vehicle對照以及逐漸增加Triton?X-100濃度的實驗組（處理1小時）。然后轉移細胞至圓底板，與WST-1溶液孵育，最后在450nm讀數(shù)。OD值隨細胞數(shù)升高，隨Triton?X-100濃度的升高而降低。?
圖2.?起始細胞數(shù)量對450nm吸光度的影響。HEK293細胞以不同起始細胞密度加入3D培養(yǎng)板，將培養(yǎng)板移入37度CO2孵育箱中。4天后，細胞經Vehicle,?0.001%或0.01%?Triton?X-100處理1小時，然后轉移至圓底板，每孔加入WST-1試劑。細胞于37度孵育3.5小時后，于450nm測定吸光度。
應用二.?細胞毒性檢測
細胞膜完整性的喪失是細胞毒性的表現(xiàn)形式之一，導致細胞的滲漏。LDH是一個可溶性的胞漿酶，可從受損細胞釋放到培養(yǎng)基中，因此被用作細胞溶解、細胞毒性以及細胞活性等的標志分子。Cayman開發(fā)的Perfecta3D?細胞毒性檢測試劑盒（產品編號：601050）提供3D細胞培養(yǎng)板以及檢測LDH的必需試劑。細胞培養(yǎng)于懸滴中，通常含40-50ul的培養(yǎng)基，如要處理細胞，可移出10ul培養(yǎng)基，加入含有測試化合物的替換培養(yǎng)基。進行細胞毒性檢測時，可移出10ul培養(yǎng)基，然后將細胞轉移至標準的96孔板，用LDH試劑進行檢測。490nm讀數(shù)，吸光度與LDH濃度線性相關（圖3）。
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圖3.?LDH標準曲線。LDH標準品溶于不含F(xiàn)BS的RPMI?1640中，然后每孔加入100ul的反應液，室溫孵育30分鐘。