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膠原抗體誘導(dǎo)小鼠關(guān)節(jié)炎模型之CAIA實(shí)驗(yàn)方案

2023-06-29
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PROTOCOL TO INDUCE CAIA

CAIA實(shí)驗(yàn)方案


Chondrex公司建議尾靜脈注射單克隆抗體合劑。對(duì)于易感品系,可采用腹腔注射,但是通過腹腔注射CAIA誘發(fā)的炎癥嚴(yán)重程度往往較低,關(guān)節(jié)炎持續(xù)時(shí)間也較短。請(qǐng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇合適的實(shí)驗(yàn)方案。

Catalog NumberAmount
53100100mg
5304040mg
53010


A. Inducing CAIA without LPS

膠原抗體誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎


在易感品系DBA/1和Balb/c小鼠中采用CAIA建立關(guān)節(jié)炎模型,根據(jù)動(dòng)物供應(yīng)商,動(dòng)物周齡和體積大小的不同,每只小鼠需注射6-10mg單克隆抗體合劑。例如,初次注射免疫5mg抗體合劑后24小時(shí)再次注射5mg抗體合劑。關(guān)節(jié)炎會(huì)在二次免疫后的24-48小時(shí)后發(fā)生。研究員需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼{(diào)整實(shí)驗(yàn)方案。


B. Inducing CAIA with LPS?

膠原抗體聯(lián)用LPS誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎


細(xì)菌毒素LPS(B細(xì)胞分裂素), MAM(支原體產(chǎn)生的T細(xì)胞分裂素)或SEB(金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的T 細(xì)胞分裂素)和膠原抗體在誘發(fā)關(guān)節(jié)炎中具有協(xié)同效應(yīng)。在這些毒素的存在下,誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎的抗體合劑的量可降低。例如,每只小鼠初次免疫注射1.5mg抗體合劑后第三天注射25-50μgLPS,對(duì)于易感品系小鼠(Balb/c, DBA/1,B10.RIII, and C.B-17 scid/scid mice),關(guān)節(jié)炎的發(fā)生率高達(dá)100%。在C57BL/6小鼠尾部靜脈注射5mg抗體合劑,關(guān)節(jié)炎在初次免疫后第7-10天達(dá)到最嚴(yán)重, 可維持兩周。在初次免疫第10或14天注射25-50μgLPS, 關(guān)節(jié)炎會(huì)持續(xù)惡化。盡管三周后炎癥反應(yīng)有所緩解,關(guān)節(jié)破壞是永久性的,甚至導(dǎo)致關(guān)節(jié)強(qiáng)直。


EVALUATING ARTHRITIS

關(guān)節(jié)炎評(píng)估


關(guān)節(jié)炎可通過臨床評(píng)分來定性評(píng)估或用測(cè)厚儀來測(cè)量爪子厚度來評(píng)估。由于小鼠的爪子太小,因此無法像測(cè)量大鼠爪子體積那樣通過浸沒法測(cè)定小鼠爪子體積。

Chondrex公司提供以下評(píng)分系統(tǒng)(表二)


表二 關(guān)節(jié)炎炎癥程度的臨床評(píng)分

得分發(fā)病情況
0Normal 正常
1Mild, but definite redness and swelling of the ankle or wrist, or apparent redness and swelling limited to individual digits, regardless of the number of affected digits?

輕度的、踝關(guān)節(jié)、腕關(guān)節(jié)發(fā)紅、腫脹

2Moderate redness and swelling of ankle or wrist 踝關(guān)節(jié)或腕關(guān)節(jié)中度發(fā)紅腫脹
3Severe redness and swelling of the entire paw

including digits

爪子嚴(yán)重發(fā)紅、腫脹,包括指端

4Maximally inflamed limb involving multiple joints 四肢最大程度發(fā)炎,包括多關(guān)節(jié)


表三 成功阻斷單克隆抗體誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎的藥物

膠原抗體誘導(dǎo)小鼠關(guān)節(jié)炎模型之CAIA實(shí)驗(yàn)方案



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