? 早在1983年，ELISpot就被用于從單細(xì)胞水平鑒定抗體的分泌，作為一種高靈敏的檢測(cè)方法，ELISpot可成功用于檢測(cè)抗體分泌B 細(xì)胞的頻率。B細(xì)胞分泌多種類(lèi)型的免疫球蛋白，同時(shí)也分泌抗原特異性免疫球蛋白，可用ELISpot來(lái)計(jì)數(shù)抗體分泌B細(xì)胞。通常將抗原特異性B細(xì)胞的數(shù)量與總抗體分泌B細(xì)胞進(jìn)行對(duì)比。在接觸抗原（如疫苗接種）的6-9天后B細(xì)胞就能分泌抗原特異性抗體。往往經(jīng)多克隆刺激后，才有可能檢測(cè)到記憶B細(xì)胞的抗體分泌。
? ? ? ??有2種方式來(lái)檢測(cè)抗原特異性B細(xì)胞：用抗原（A）或特異的抗免疫球蛋白抗體（B）包被PVDF板。利用生物素化的anti-IgG (A)或生物素化的抗原（B）來(lái)識(shí)別捕獲的抗原特異性抗體。第二種方法僅需要少量的抗原就能產(chǎn)生更多清晰的斑點(diǎn)。使用FluoroSpot試劑盒可以檢測(cè)B細(xì)胞分泌的多個(gè)免疫球蛋白亞型（請(qǐng)參考FluoroSpot熒光免疫斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)）。?
圖1. B細(xì)胞ELISpot實(shí)驗(yàn)原理：A（抗原包被）和B（生物素化抗原檢測(cè)）顯示2種不同的ELISpot方法檢測(cè)抗原特異性B細(xì)胞；C為B細(xì)胞總IgG的ELISpot檢測(cè) ??? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??
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圖2.?使用R848和重組IL-2刺激培養(yǎng)PBMC細(xì)胞72h后，洗滌細(xì)胞，轉(zhuǎn)移到ELISpot板培養(yǎng)并分析總IgG分泌的B細(xì)胞?(50,000??cells/well,?過(guò)夜孵育)? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
?B細(xì)胞ELISpot試劑盒信息
?產(chǎn)品名稱(chēng) | ?編號(hào) | ?供應(yīng)商 |
| ?人B細(xì)胞ELISpot試劑盒 |
?Human IgA ELISpotPlus?kit (ALP) ,with 4 plates | ?3860-2AW-Plus | ?Mabtech |
?Human IgA ELISpotPlus?kit (HRP) ,with 4 plates | ?3860-2HW-Plus | ?Mabtech |
?Human IgE ELISpotPlus?kit (ALP) ,with 4 plates | ?3810-2AW-Plus | ?Mabtech |
?Human IgE ELISpotPlus?kit (HRP) ,with 4 plates | ?3810-2HW-Plus | ?Mabtech |
?Human IgG ELISpotPlus?kit (ALP) ,with 4 plates | ?3850-2AW-Plus | ?Mabtech |
?Human IgG ELISpotPlus?kit (HRP) ,with 4 plates | ?3850-2HW-Plus | ?Mabtech |
?Human IgM ELISpotPlus?kit (ALP) ,with 4 plates | ?3840-2AW-Plus | ?Mabtech |
?Human IgM ELISpotPlus?kit (HRP) ,with 4 plates | ?3840-2HW-Plus | ?Mabtech |
?猴B細(xì)胞ELISpot試劑盒 |
?Monkey IgA ELISpotPlus?kit (ALP) ,with 4 plates | ?3860M-2AW-Plus | ?Mabtech |
?Monkey IgA ELISpotPlus?kit (HRP) ,with 4 plates | ?3860M-2HW-Plus | ?Mabtech |
?小鼠B細(xì)胞ELISpot試劑盒 |
?Mouse IgA ELISpotPlus?kit (ALP) ,with 4 plates | ?3835-2AW-Plus | ?Mabtech |
?Mouse IgA ELISpotPlus?kit (HRP) ,with 4 plates | ?3835-2HW-Plus | ?Mabtech |
?Mouse IgG ELISpotPlus?kit (ALP) ,with 4 plates | ?3825-2AW-Plus | ?Mabtech |
?Mouse IgG ELISpotPlus?kit (HRP) ,with 4 plates | ?3825-2HW-Plus | ?Mabtech |
?Mouse IgM ELISpotPlus?kit (ALP) ,with 4 plates | ?3845-2AW-Plus | ?Mabtech |
?Mouse IgM ELISpotPlus?kit (HRP) ,with 4 plates | ?3845-2HW-Plus |
?Mabtech |