外泌體是指包含了復(fù)雜 RNA 和蛋白質(zhì)的小膜泡 (30-150nm)，現(xiàn)今，其特指直徑在40-100nm的盤(pán)狀囊泡。1983年，外泌體首次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)， 1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中 。
外泌體的提?。ㄌ峒儯┲饕ㄒ韵聨追N方式：
一是超速離心法：這是外泌體提取最常用的方法 。此種方法得到的外泌體量多，但是純度不足，電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊， 由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn)，也有一些研究認(rèn)為此種 方法得到的是微泡不是外泌體 ；
二是過(guò)濾離心：這種操作簡(jiǎn)單、省時(shí)，不影響外泌體的生物活性 ，但同樣存在純度不足的問(wèn)題；
三是密度梯度離心法：用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期準(zhǔn)備工作繁雜，耗時(shí)，量少；
四是免疫磁珠法：這種方法可以保證外泌體形態(tài) 的完整，特異性高、操作簡(jiǎn)單、不需要昂貴的儀器設(shè)備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會(huì)影響外泌體生物活性，不便進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)；
五是PS親和法：該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似，獲得的外泌體形態(tài)完整，純度最高。由于不使用變性劑，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。2016.9《Scientific Reports》雜志發(fā)表了該方法最新數(shù)據(jù)，表明PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體;
六是色譜法：這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一， 但是需要特殊的設(shè)備，應(yīng)用不廣泛 。
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