產(chǎn)品信息
貨號:tlrl-pglps
產(chǎn)品包裝
- 1 mg 脂多糖
- 1.5 ml無內(nèi)毒素水
產(chǎn)品描述
LPS-PG是從革蘭氏陰性菌Porphyromonas gingivalis(牙齦卟啉單胞菌)分離得到的脂多糖(LPS),LPS是革蘭氏陰性菌重要的組成成分,可活化天然免疫系統(tǒng),LPS-PG是引起牙周疾病的重要毒力因子。
LPS的識別主要是由TLR4調(diào)節(jié)的,TLR4對LPS-PG的應(yīng)答依賴于兩個(gè)關(guān)鍵因子CD14和MD2。
LPS-PG具有一個(gè)獨(dú)特的異質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu),可與其他腸道細(xì)菌來源的LPS區(qū)別開來。LPS-PG對于TLR4缺陷的C3H/HeJ小鼠具有活性,人們普遍認(rèn)為LPS-PG是TLR2的配體。但是,對于LPS-PG結(jié)構(gòu)和功能的研究發(fā)現(xiàn)其是通過TLR4激活細(xì)胞的。LPS-PG激活TLR2是由于脂蛋白污染造成的。
質(zhì)量控制
- 使用HEK-Blue? TLR4細(xì)胞質(zhì)控TLR4活性?
- 使用HEK-Blue? TLR2細(xì)胞控質(zhì)控其他細(xì)菌成分(如脂蛋白)的存在
運(yùn)輸及保存
- 室溫運(yùn)輸
- 到貨后,需在-20℃保存
- 溶解后的LPS-PG可在4℃保存1個(gè)月或者-20℃保存6個(gè)月
使用方法
1. 制備儲存液 (1 mg/ml)?
加入1 ml無內(nèi)毒素水制備1 mg/ml LPS-PG儲存液,混合均勻后分裝儲存液,冷藏或冷凍保存,進(jìn)一步稀釋使用水進(jìn)行稀釋。
2. 工作濃度
TLR4 activity: 100 ng - 10 μg/ml?
TLR2 activity: 10 ng/ml - 10 μg/ml?
3. 激活TLR2 & TLR4
分別使用HEK-Blue? TLR2 細(xì)胞和HEK-Blue? TLR4細(xì)胞來檢測TLR2和TLR4被LPS-PG激活的情況。HEK-Blue? TLR細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)NF-kB誘導(dǎo)的secreted embryonic alkaline phosphatase (SEAP)并過表達(dá)一個(gè)TLR基因。?
- 在96孔板中加入20μl不同濃度(10 ng - 10 μg/ml)的LPS-PG?
- 在96孔板中加入180μl HEK-Blue? TLR細(xì)胞上清
- 在37°C, 5% CO2條件下反應(yīng)6 - 24 h?
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