ChromaLink生物偶聯(lián)技術(shù)是基于由芳香肼和芳香醛形成穩(wěn)定的雙芳基腙。S-HyNic(琥珀酰亞胺基6-肼基煙酸丙酮腙，SAH)用于在生物分子上摻入芳香肼部分。S-HyNic是一種胺反應(yīng)試劑，直接將生物分子和表面的氨基轉(zhuǎn)化為HyNic基團(tuán)。S-4FB(琥珀酰亞胺基4-甲酰苯甲酸酯，SFB)用于將氨基轉(zhuǎn)化為芳香醛(4-甲酰苯甲酰胺(4FB)基團(tuán))。向4FB修飾的生物分子或表面添加HyNic修飾的生物分子直接導(dǎo)致綴合物的形成(圖1)。雙芳基腙鍵對92O和pH 2.0-10.0穩(wěn)定。由于抗體在低酸堿度(即< 5.0)下免疫反應(yīng)的不穩(wěn)定性，抗體結(jié)合的推薦酸堿度為6.0。與基于硫醇的偶聯(lián)協(xié)議不同，基于硫醇的偶聯(lián)協(xié)議需要還原劑，還原劑可以通過切割二硫鍵損害蛋白質(zhì)的活性，HyNic-4FB偶聯(lián)使二硫鍵保持完整。共軛物的制備不需要氧化劑、還原劑或金屬。
圖1. ChromaLinkTM?technology示意圖。
圖2.使用Protein-Protein Conjugation Kit的方案圖。
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