在免疫組化檢測(cè)過(guò)程中，許多樣本組織會(huì)產(chǎn)生可通過(guò)各種波長(zhǎng)濾光片的組織內(nèi)源性自發(fā)熒光，干擾抗體標(biāo)記的目的蛋白熒光的觀察，甚至導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。為了解決免疫組化實(shí)驗(yàn)中的自發(fā)熒光，VectorLabs公司專門開(kāi)發(fā)了一款Vector??True VIEW? Autofluorescence Quenching Kit試劑盒，該產(chǎn)品旨在去除組織切片中由于醛固定、紅細(xì)胞以及膠原蛋白/彈性蛋白結(jié)構(gòu)造成的自發(fā)熒光。該試劑使用方便，無(wú)需稀釋操作，為即用型試劑。?該試劑盒中含有防自發(fā)熒光效果excellent的VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 封片劑（含或不含DAPI兩種）?？蛻魺o(wú)需單獨(dú)購(gòu)買封片劑，經(jīng)濟(jì)、實(shí)用。
注意：該試劑盒對(duì)脂褐素造成的組織自發(fā)熒光無(wú)效。
● 試劑盒組成：?
a. Vector?TrueVIEW? Reagent A 5ml?b. Vector?TrueVIEW? Reagent B 5ml?c. Vector?TrueVIEW? Reagent C 5ml?d. VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 2ml?e. VECTASHIELD Vibrance Antifade? Mounting Media with DAPI 2ml
其中，貨號(hào)SP-8400包含a,b,c,d四個(gè)組分；貨號(hào)SP-8500包含a,b,c,e四個(gè)組分
●?產(chǎn)品使用方法：
 ? | 將ReagentA、B、C以1:1:1的比例混合。（注意混合順序，先將A和B以1:1比例混合10s，再加入C,混勻10s） |  ? |
 ? | 將混好后的TrueView試劑滴加到組織樣本切片上，將樣本完全覆蓋，孵育2-5min |  ? |
 ? | 使用PBS緩沖液洗片5次，除去多余緩沖液，VECTASHIELD?Vibrance Media封片后觀察 |  ? |
●?產(chǎn)品特征?
A 顯著降低背景染色并保留特異性抗原染色；?B 提高信噪比；?C 產(chǎn)品穩(wěn)定，儲(chǔ)存在滴瓶中，使用方便；?D 操作簡(jiǎn)單，快速；整個(gè)染色過(guò)程僅需2-5min；?E 為使用者提供清晰、明確、真實(shí)的染色結(jié)果；?F 適用于多種熒光染料的自發(fā)熒光去除，包括Alexa488，Alexa 594，DyLight 488，DyLight 594，F(xiàn)ITC，Cyanine 5和GFP；
G SP-8500試劑盒中的封片劑中DAPI濃度較高，可對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行清晰的染色。
●?產(chǎn)品對(duì)自發(fā)熒光淬滅效果:
| ◆?右圖為經(jīng)Vector?TrueVIEW?kit處理后，人腎臟組織切片中自發(fā)熒光淬滅的百分比與處理時(shí)間之間的關(guān)系。?◆?Note：2分鐘內(nèi)即可達(dá)到最大淬滅效果。 |  ? |
●?產(chǎn)品應(yīng)用舉例：??
＞ 案例一
| 未經(jīng)任何處理 | 使用Vector?TrueVIEW?處理 |
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| ◆ 上圖為人脾臟組織染色結(jié)果：使用VectaFluor TM Duet試劑盒（DK-8818）檢測(cè)的mouse anti-CD20（red）和rabbit anti-Ki67（green）對(duì)人脾組織切片的染色。?◆?左圖為未經(jīng)任何處理的染色結(jié)果，?◆?右圖為使用TrueVIEW?Autofluorescence Quenching試劑盒染色結(jié)果。于未經(jīng)處理的染色結(jié)果相比，經(jīng)TrueVIEW?Autofluorescence Quenching試劑盒處理后，自發(fā)熒光顯著減少。 |
＞?案例二
 ? | ◆?A-D圖為人腎臟切片（石蠟切片）染色結(jié)果，實(shí)驗(yàn)中使用anti-AE1 /AE3抗體對(duì)角蛋白進(jìn)行染色（綠色）?！?A圖未經(jīng)處理，?◆?B-D圖經(jīng)TrueVIEW?Quencher Kit處理。自發(fā)熒光明顯減弱。延長(zhǎng)曝光時(shí)間，陽(yáng)性信號(hào)強(qiáng)度也隨之增強(qiáng)。 |
 ? |  |  |
＞?案例三
| 未經(jīng)任何處理 | 使用TrueVIEW Treatment Mounted with Vibrance + 3x DAPI處理 |
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◆?上圖為人胰腺組織染色結(jié)果：綠色為insulin的染色。
◆?左圖為未經(jīng)任何處理的染色結(jié)果，
◆?右圖為使用TrueVIEW Treatment Mounted with Vibrance + 3x DAPI（SP-8500）試劑盒染色結(jié)果。與未經(jīng)處理的染色結(jié)果相比，經(jīng)該試劑盒處理后，自發(fā)熒光顯著減少，核染色顯著增強(qiáng)。 |
＞?案例四
| 未經(jīng)處理（內(nèi)源性自發(fā)熒光）?? | 經(jīng)TrueVIEW?Quencher Kit處理 |
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| Company A | Company B | Company C |
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| Copper Sulfate Solution | Sodium Borohydride | Sudan Black B |
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●?產(chǎn)品訂購(gòu)信息?Vector??True VIEW? Autofluorescence Quenching Kit
| 產(chǎn)品 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 染色切片數(shù) |
Vector??True VIEW?
Autofluorescence Quenching Kit | SP-8400 | 15ml | 100-150 |
Vector??True VIEW?
Autofluorescence Quenching Kit | SP-8500 | 15ml | 100-150 |
VECTOR TrueVIEW??
Autofluorescence Quenching Kit (3ml) | SP-8403 | 3ml | ~30 |
VECTASHIELD??HardSet?
Antifade Mounting Medium | H-1400 | 10ml | 100-150 |
VECTASHIELD??HardSet?
with DPI Antifade Mounting Medium | H-1500 | 10ml | 100-150 |
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