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多聚物(Polymer-Based)檢測系統(tǒng)

2022-10-14
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基于非生物素微聚合物的檢測系統(tǒng)、信號強、背景低、靈敏度高。


與傳統(tǒng)基于親和素-生物素復(fù)合物檢測方法(例如,ABC試劑盒)相比,基于微聚合物的檢測是IHC檢測中較為先進的實驗方法之一。相較于ABC法,微聚合物檢測具有顯著的優(yōu)勢,例如在同一組織切片上進行多抗原標(biāo)記(multiplexing),或樣本本身內(nèi)源性生物素水平較高等情況,使用微聚合物法進行檢測更易獲得理想的染色結(jié)果。


該微聚合物檢測系統(tǒng)主要由酶復(fù)合物和二抗(可與一抗結(jié)合)聚合在一起組成。與使用酶標(biāo)二抗相比,這種聚合物形式可在靶標(biāo)蛋白染色位點引入更多的酶,使用底物顯色時,可產(chǎn)生更強的信號。此外,ABC法需要二抗和親和素-生物素復(fù)合物單獨孵育(兩次孵育),而微聚合物法僅需一個孵育步驟,大大縮短了IHC的實驗流程。


最初引入的微聚合物檢測系統(tǒng)是由葡聚糖或其類似物組成。由于其體積較大,在某些組織中存在一些固有問題。Vector Laboratories的ImmPRESS微聚合物系統(tǒng)經(jīng)過多重優(yōu)化,由體積較小的微聚合物組成,更容易滲透到樣本中,尤其是較厚不易著色的部位,可最大限度的避免空間位阻,與一抗進行特異性結(jié)合。

多聚物(Polymer-Based)檢測系統(tǒng)多聚物(Polymer-Based)檢測系統(tǒng)

乳腺癌組織樣本:

? Estrogen Receptor(m), ImmPRESS Reagent(HRP; Universal),?

?Vector DAB(棕色),

? Cytokeratin AE1/AE3(m), VECTASTAIN ABC-AP Kit(Universal),?

?Vector Red(洋紅)。

乳腺癌組織樣本:

? Estrogen Receptor(m), ImmPRESS Reagent(HRP; Universal),?

?Vector NovaRED? HRP Substrate(紅色),

? CD34(m), ImmPRESS Reagent(HRP; Universal), Vector DAB+Ni?

?HRP Substrate(灰黑色)。

多聚物(Polymer-Based)檢測系統(tǒng)多聚物(Polymer-Based)檢測系統(tǒng)

小腸組織樣本:

? Neurofilament 200 kDa(m), ImmPRESS Reagent(HRP) Anti-Mouse?

?IgG, Vector VIP(紫色) ,

? Desmin(m), ImmPRESS Reagent(HRP) Anti-Mouse IgG, Vector?

?SG(藍灰色)。

乳腺癌組織樣本:

? Estrogen Receptor(m), ImmPRESS Reagent(HRP; Universal),?

?Vector NovaRED?(紅色),

? CD34(m), VECTASTAIN ABC-AP Kit(Universal), Vector Blue(藍色)。


ImmPRESS? One-Step 一步法多聚物檢測系統(tǒng)(適用于單抗原檢測)


ImmPRESS Polymer檢測系統(tǒng)

ImmPRESS聚合物試劑由高活性的過氧化物酶或堿性磷酸酶與經(jīng)預(yù)吸附、親和純化的二抗形成的微聚合物組合而成。這種獨特的微聚合物偶聯(lián)技術(shù)可使抗體與足夠的酶結(jié)合,并以最小空間分子形式與靶標(biāo)結(jié)合。由于ImmPRESS聚合物試劑提高了識別靶標(biāo)蛋白的概率,可獲得特異性結(jié)合、信噪比高以及低背景的高清晰染色結(jié)果,使其成為免疫組織化學(xué)和免疫細胞化學(xué)染色的又一利器。


  • 靈敏度高,背景低——染色結(jié)果清晰、特異性強

  • 即用型一步法檢測——無需混合操作,染色方便易行

  • 包含預(yù)稀釋的封閉血清

  • 檢測所需時間短

  • 非生物素檢測系統(tǒng)

  • 分辨率高

  • 適用于細胞核和細胞膜抗原染色

  • 適用于多抗原染色


ImmPRESS HRP PLUS Polymer Kits

與non-PLUS ImmPRESS HRP Polymer Kits相比,ImmPRESS HRP PLUS Polymer Kits所含組分試劑更多,包含了完成IHC實驗流程的一些其他輔助試劑。ImmPRESS HRP PLUS Polymer Kits無需實驗者對實驗條件進行過多優(yōu)化,其包含IHC實驗必需的全套試劑,大大簡化了檢測步驟。

ImmPRESS HRP PLUS Polymer Kits試劑盒組成:

-BLOXALL 內(nèi)源性酶封閉試劑

-2.5% 正常血清

-ImmPRESS HRP polymer reagent?

-ImmPACT DAB EqV底物(色原和稀釋液)


ImmPRESS VR Polymer Kits

此外,Vector Laboratories還提供預(yù)先經(jīng)交叉吸附的ImmPRESS VR (Veterinary Reagents) Kits,該試劑盒常用于基礎(chǔ)研究的動物模型(如牛、山羊、綿羊、豬、馬、貓、狗、兔、大鼠、小鼠)中靶標(biāo)蛋白的診斷和檢測,其內(nèi)源性組織的交叉反應(yīng)最小。


ImmPRESS Polymer Kits使用步驟

多聚物(Polymer-Based)檢測系統(tǒng)


ImmPRESSOne-StepDoubleStainingPolymer Systems(適用于雙抗原染色)


ImmPRESS Duet Double Staining Polymer Systems

ImmPRESS Duet Double Staining Polymer Kits(雙抗原染色試劑盒)能夠在同一組織切片上對兩種不同的靶標(biāo)抗原進行快速、清晰的定位和觀察。利用Vector公司獨特的ImmPRESS聚合物技術(shù),將高活性辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AP)酶聚合物與經(jīng)高度交叉預(yù)吸附、親和純化的二抗(鼠抗和兔抗)結(jié)合。然后將這些試劑以最優(yōu)稀釋度混合,最后形成穩(wěn)定的預(yù)稀釋、即用型HRP/AP形式的試劑。該試劑盒可與來源于小鼠和兔的一抗搭配使用,并可節(jié)省實驗時間、簡化實驗步驟,一步即可完成雙抗原染色,大大提高了實驗效率。為了獲得高靈敏度和雙抗原著色對比明顯的染色結(jié)果,該試劑盒包含兩種不同酶底物,ImmPACT DAB EqV(HRP,棕色)和ImmPACT Vector Red(AP,洋紅)底物。


ImmPRESS Duet Double Staining Polymer Kit還適用于非嚙齒動物組織樣本的雙抗原染色。不論是在同一細胞的同一結(jié)構(gòu)中,對兩種靶標(biāo)抗原進行共定位(不會重疊),還是區(qū)分不同的細胞區(qū)室或不同的細胞類型中表達的抗原,使用該試劑盒均可獲得可靠且可重復(fù)的結(jié)果。


ImmPRESS Duet Double Staining Polymer Kit試劑盒組成:

? BLOXALL 內(nèi)源性酶封閉試劑

? 2.5% 正常馬血清

? ImmPRESS Duet HRP/AP Polymer Reagent ( Anti-Rabbit IgG and Anti-

?Mouse IgG混合物)?

? ImmPACT DAB EqV 底物 (HRP, 棕色)?

? ImmPACT Vector Red 底物 (AP, 品紅色)


ImmPRESS One-Step Double Staining Polymer Systems使用步驟

多聚物(Polymer-Based)檢測系統(tǒng)


ImmPRESS Two-Step兩步法多聚物檢測系統(tǒng)(適用于單抗原染色)


ImmPRESS Excel Amplified Polymer Staining Systems

ImmPRESS Excel Amplified Peroxidase(HRP)Polymer染色系統(tǒng)是完整形式的染色試劑盒,可充分利用ImmPRESS HRP Polymer系統(tǒng)技術(shù)的所有優(yōu)勢,操作簡便快速且具有更高的靈敏度。

該檢測系統(tǒng)采用即用型(R.T.U)信號放大抗體,并搭配ImmPRESS Excel HRP Polymer試劑一起使用。這些試劑均經(jīng)過親和純化和多種屬交叉吸附處理,確??梢垣@得更高靈敏度和更低背景的染色結(jié)果。與其內(nèi)帶有的ImmPACT DAB EqV底物聯(lián)合使用,可產(chǎn)生清晰的深棕色反應(yīng)產(chǎn)物,這也是ImmPRESS/ImmPACT系列產(chǎn)品的

一大特色——超高靈敏度。

如果需要檢測的靶標(biāo)抗原表達較弱,在未知其表達水平的情況下,如基因敲入研究,或確定靶基因表達是否上調(diào)時,推薦使用ImmPRESS Excel Amplified HRP Kits。該試劑盒檢測結(jié)果可靠、一致,試劑無需稀釋,大大縮短了實驗時間。

ImmPRESS Excel Amplified

Polymer Kits (Peroxidase)

Anti-Rabbit IgG

Anti-Mouse IgG

多聚物(Polymer-Based)檢測系統(tǒng)
Colon:Anti-CD34 (m), ImmPRESS ExcelAmplified?

Anti-Mouse IgG Staining Kit,ImmPACT DAB?

EqV (brown), HematoxylinQS counterstain (blue).


ImmPRESS Excel Amplified Staining Kit試劑盒組成:

? BLOXALL 內(nèi)源性酶封閉試劑

? 2.5% 正常馬血清

? Amplifier Antibody (goat anti-rabbit IgG 或 goat anti-mouse IgG)

?? ImmPRESS Excel Polymer檢測試劑 (horse anti-goat IgG)

? ImmPACT DAB EqV 底物 (色原和稀釋液)


ImmPRESS Two-Step Amplified Polymer Systems使用步驟

多聚物(Polymer-Based)檢測系統(tǒng)



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