在免疫組化檢測過程中，許多樣本組織會(huì)產(chǎn)生可通過各種波長濾光片的組織內(nèi)源性自發(fā)熒光，干擾抗體標(biāo)記的目的蛋白熒光的觀察，甚至導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。為了解決免疫組化實(shí)驗(yàn)中的自發(fā)熒光，VectorLabs公司專門開發(fā)了一款Vector??True VIEW? Autofluorescence Quenching?Kit試劑盒，該產(chǎn)品旨在去除組織切片中由于醛固定、紅細(xì)胞以及膠原蛋白/彈性蛋白結(jié)構(gòu)造成的自發(fā)熒光。該試劑使用方便，無需稀釋操作，為即用型試劑。
該試劑盒中含有防自發(fā)熒光效果極佳的VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 封片劑（含或不含DAPI兩種）?？蛻魺o需單獨(dú)購買封片劑，經(jīng)濟(jì)、實(shí)用。
注意：該試劑盒對(duì)脂褐素造成的組織自發(fā)熒光無效。
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● 試劑盒組成：
Vector??TrueVIEW? Reagent A ???5 ml
Vector??TrueVIEW? Reagent B ???5 ml
Vector??TrueVIEW? Reagent C ???5 ml
VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media ???????????????2 ml
VECTASHIELD Vibrance Antifade??Mounting Media with DAPI ????2ml
其中，貨號(hào)SP-8400包含a,b,c,d四個(gè)組分；貨號(hào)SP-8500包含a,b,c,e四個(gè)組分
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●?產(chǎn)品使用方法：
 | 將ReagentA、B、C以1:1:1的比例混合。（注意混合順序，先將A和B以1:1比例混合10s，再加入C,混勻10s） |  |
 | 將混好后的TrueView試劑滴加到組織樣本切片上，將樣本完全覆蓋，孵育2-5min |  |
 | 使用PBS緩沖液洗片5次，除去多余緩沖液，VECTASHIELD
Vibrance Media封片后觀察 |  |
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●?產(chǎn)品特征：
A 顯著降低背景染色并保留特異性抗原染色；
B 提高信噪比；
C 產(chǎn)品穩(wěn)定，儲(chǔ)存在滴瓶中，使用方便；
D 操作簡單，快速；整個(gè)染色過程僅需2-5min；
E 為使用者提供清晰、明確、真實(shí)的染色結(jié)果；
F 適用于多種熒光染料的自發(fā)熒光去除，包括Alexa 488， Alexa 594， DyLight 488，DyLight 594，FITC，Cyanine 5和GFP；
G SP-8500試劑盒中的封片劑中DAPI濃度較高，可對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行清晰的染色。
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●?產(chǎn)品對(duì)自發(fā)熒光淬滅效果：
右圖為經(jīng)Vector?TrueVIEW?kit處理后，人腎臟組織切片中自發(fā)熒光淬滅的百分比與處理時(shí)間之間的關(guān)系。
Note：2分鐘內(nèi)即可達(dá)到最大淬滅效果。 |  |
●?產(chǎn)品應(yīng)用舉例：
案例一
| 未經(jīng)任何處 | 使用Vector??TrueVIEW?處理 |
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| 上圖為人脾臟組織染色結(jié)果：使用VectaFluor TM Duet試劑盒（DK-8818）檢測的mouse anti-CD20（red）和rabbit anti-Ki67（green）對(duì)人脾組織切片的染色。左圖為未經(jīng)任何處理的染色結(jié)果，右圖為使用TrueVIEW?Autofluorescence Quenching試劑盒染色結(jié)果。于未經(jīng)處理的染色結(jié)果相比，經(jīng)TrueVIEW?Autofluorescence Quenching試劑盒處理后，自發(fā)熒光顯著減少。 |
案例二
 | A-D圖為人腎臟切片（石蠟切片）
染色結(jié)果，實(shí)驗(yàn)中使用anti-AE1 /AE3抗體對(duì)角蛋白進(jìn)行染色（綠色）。A圖未經(jīng)處理，B-D圖經(jīng)TrueVIEW?Quencher Kit處理。自發(fā)熒光明顯減弱。延長曝光時(shí)間，陽性信號(hào)強(qiáng)度也隨之增強(qiáng)。 |
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案例三
| 未經(jīng)任何處理 | 使用TrueVIEW Treatment Mounted?
with Vibrance + 3x DAPI處理 |
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| 上圖為人胰腺組織染色結(jié)果：綠色為insulin的染色。左圖為未經(jīng)任何處理的染色結(jié)果，右圖為使用TrueVIEW Treatment Mounted with Vibrance + 3x DAPI（SP-8500）試劑盒染色結(jié)果。與未經(jīng)處理的染色結(jié)果相比，經(jīng)該試劑盒處理后，自發(fā)熒光顯著減少，核染色顯著增強(qiáng)。 |
案例四
| 未經(jīng)任何處理 | 使用TrueVIEW Treatment Mounted?
with Vibrance + 4x DAPI處理 |
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| 上圖為人前列腺組織染色結(jié)果：紅色為上皮細(xì)胞的染色。左圖為未經(jīng)任何處理的染色結(jié)果，右圖為使用TrueVIEW Treatment Mounted with Vibrance + 4x DAPI（SP-8500）試劑盒染色結(jié)果。與未經(jīng)處理的染色結(jié)果相比，經(jīng)該試劑盒處理后，自發(fā)熒光顯著減少，核染色顯著增強(qiáng)。 |
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●?與市場上同類產(chǎn)品效果比較：
| 未經(jīng)處理（內(nèi)源性自發(fā)熒光）?? | 經(jīng)TrueVIEW?Quencher Kit處理 |
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| Company A | Company B | Company C |
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| Copper Sulfate Solution | Sodium Borohydride | Sudan Black B |
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●?產(chǎn)品訂購信息：
Vector??True VIEW??Autofluorescence Quenching Kit
| 產(chǎn)品 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 染色切片數(shù) |
| Vector??True VIEW? Autofluorescence Quenching Kit | SP-8400 | 15ml | 100-150 |
| Vector??True VIEW? Autofluorescence Quenching Kit | SP-8500 | 15ml | 100-150 |
| VECTOR TrueVIEW??Autofluorescence Quenching Kit (3ml) | SP-8403 | 3ml | ~30 |
| VECTASHIELD??HardSet? Antifade Mounting Medium | H-1400 | 10 ml | 100-150 |
| VECTASHIELD??HardSet? with DPI Antifade Mounting Medium | H-1500 | 10 ml | 100-150 |
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