1.要測誰？
確認(rèn)目標(biāo)蛋白特性
2.誰去測？
抗體種類
a.單克?。簩Ｒ恍愿?，靈敏度較多克隆低
b.多克?。红`敏度高，批次差異較大
c.重組抗體：批次差異小
抗體驗證
3.被誰測？
一抗二抗配對
a.兔配兔，鼠配鼠，一抗二抗想配不出錯
b.做免疫組化如一抗宿主種屬和樣本種屬來源相同時，需要注意樣本內(nèi)源性IgG是否與二抗結(jié)合產(chǎn)生假陽性
呈色方式
a.HRP,AP呈色
b.熒光（多染時抗體種屬或亞型不相同，使用的熒光波長不相近）
二抗專一性
a.使用交叉預(yù)吸附型二抗提高抗體專一性
4.在哪測？
做什么應(yīng)用，用什么抗體
a.環(huán)境不同，依應(yīng)用挑抗體
b.做IP實驗時，挑選EasyBlot二抗，去除重輕鏈干擾
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